梨葉緣焦枯病
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梨葉緣焦枯病(pear leaf scorch)為台灣特有之病害,普遍發生於横山梨(Pyrus ... bacteria) Xylella fastidiosa 相同,但梨葉緣焦枯病菌與其他寄主植物來源之X.
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1.研究單位
植物病理組
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https://scholars.tari.gov.tw/handle/123456789/4505
標題: 梨葉緣焦枯病
其他標題: Pearleafscorch
作者: 蘇秋竹馮鈞育高清文曾國欽徐世典Su,C.C.Feng,C.Y.Kao,C.W.Tzeng,K.C.Hsu,S.T.
關鍵字: 梨葉緣焦枯病;侷限導管細菌;聚合酵素連鎖反應;偵測;DNA指紋圖譜技術;16SrRNA基因序列;16S-23SrRNA基因區間序列;系統親緣分析;pearleafscorch;Xylellafastidiosa;polymerasechainreaction;detection;genomicfingerprinting;16SrRNAgenesequence;16S-23SrRNAintergenicspacerregionsequence;phylogeneticrelationship
公開日期: 十二月-2010
出版社: 農業試驗所
RelatedPublication(s): 農業試驗所特刊第149號
起(迄)頁: 83-108
來源出版物: 近年來我國重大作物病害之發生及其診斷、監測與防治研討會專刊
會議論文: 近年來我國重大作物病害之發生及其診斷、監測與防治研討會ProceedingsofSymposiumontheOccurrenceofImportantDiseasesinTaiwaninRecentYearandDevelopmentofDiseaseDiagnosis,MonitoringandControl
摘要: 梨葉緣焦枯病(pearleafscorch)為台灣特有之病害,普遍發生於横山梨(Pyruspyrifolia)栽植區,梨葉緣焦枯病菌之培養性狀及具波浪狀細胞壁(ripplecellwall)的特性與侷限導管細菌(xylem-limitedbacteria)Xylellafastidiosa相同,但梨葉緣焦枯病菌與其他寄主植物來源之X.fastidiosa菌株間無血清相關性,且以X.fastidiosa廣效性引子對272-1-int/272-2-int及RST31/RST33對梨葉緣焦枯病菌菌株進行polymerasechainreaction(PCR)反應時,亦無任何基因產物。
利用隨機引子(OPA11)進行randomamplifiedpolymorphicDNA(RAPD)分析,成功獲得對梨葉緣焦枯病菌獨有核酸片段大小為1412bp,從核酸序列中設計得到一組專一性引子對PLS-F/PLS-R可增幅出416bp大小之專一性基因產物。
此一引子對可直接進行梨葉緣焦枯病田間罹病梨樹組織之PCR檢測。
利用RAPD-PCR、enterobacterialrepetitiveintergenicconsensussequence-PCR(ERIC-PCR)及BOX-PCR三種DNA指紋圖譜技術分析所得之親緣樹狀圖皆可將8種寄主植物之X.fastidiosa菌株區分為4個菌群,分別為:(1)梨菌群、(2)夾竹桃及葡萄菌群、(3)桑椹菌群及(4)胡桃樹、李樹、桃樹及無花果菌群。
此等指紋圖譜技術均可有效鑑別梨葉緣焦枯病菌,並顯示其為X.fastidiosa菌群中唯一之獨立菌系。
進一步利用鄰聚法(NeighborJoining)進行10種不同寄主植物之X.fastidiosa菌株系統親緣分析(phylogenticanalysis),由16SrRNA序列及16S-23SrRNA區間序列所構建的親緣演化樹(phylogentictree)皆可明顯區分為2個菌群,分別為梨葉緣焦枯病菌菌群及其他9種寄主植物X.fastidiosa菌群,而其他寄主植物X.fastidiosa菌群皆可再細分4個次菌群,分別為(1)夾竹桃菌群、(2)葡萄及桑椹菌群、(3)咖啡及柑橘菌群及(4)胡桃樹、李樹、桃樹及無花果菌群。
由以上結果顯示,梨葉緣焦枯病菌為Xylella屬內僅侷限於台灣獨立的菌群與其他寄主植物X.fastidiosa菌株間為較低同源性,應可支持梨葉緣焦枯病菌為Xylella屬內亞種分類地位,甚至可能為新種。
本文研發有關侷限導管細菌PCR鑑定與偵測技術,未來有潛力應用於梨葉緣焦枯病菌之蟲媒及中間寄主植物快速偵測。
合理的管理栽培制度應可減輕梨葉緣焦枯病之嚴重度,剷除罹病株,可減少其感染源,無性繁殖時應避免剪取罹病株之枝條扦插或芽供接穗之用,化學治療方面,注射四環黴素於每年5月及10月各注射一次,有相當程度之療效,配合增施有機肥可維持病樹正常生產力。
Pearleafscorch(PLS)disease,theonlyXylellafastidiosa-induceddiseasereportedfromTaiwan,iscommonlyfoundinareaswherethevarietyHengshan(Pyruspyrifolia)isgrown.StrainsofPLSbacteriumsharessimilaritiestostrainsofX.fastidiosafromotherhostoriginsintherequirementofcomplexmediumandtherippledcellwallincellstructure.However,PLSstrainsarenotserologicallyrelatedtostrainsofX.fastidiosafromotherhosts.Likewise,noDNAfragmentwasamplifiedfromPLSstrainswithtwogeneralprimersetsofRST31/RST33and272-int/272-int-2usedtodetectstrainsofX.fastidiosafromotherhosts.Afragmentof1412bpinsizeamplifiedforPLSstrainswitharandomprimerOPA11byrandomamplifiedpolymorphicDNA(RAPD)techniquewasidentifiedasspecificforPLSstrains.AsetofspecificprimerPLS-F/PLS-Ramplifieda416bpfragmentwasdesignedfromthesequencedataforPLSstrains.ThePLSbacteriumcouldbedetectedbyusingthespecificprimersetinPLSdiseasedleaftissuescollectedfromfields.TheDNAfingerprintingsgeneratedbyRAPD-PCR,enterobacterialrepetitiveintergenicconsensussequence-PCR(ERIC-PCR)andBOX-PCRofallstrainsofX.fastidiosafromeighthosts.TheconstructeddendrogramsshowedthatallstrainsofPLSbacteriumwereclustedtogetherandseparatefromotherX.fastidiosastrains,andthelatterwereclusteredintothreegroups:oneconsistedofmulberrystrains,anotherconsistedofgrapeandoleanderstrains,andthethirdcomprisedpecan,plum,peachandsycamorestrains.OurresultsindicatethattheDNAfingerprintingsamplifiedbyarbitraryprimersareusefultodifferentiatepearleafscorchbacteriafromotherX.fastidiosastrains.Furthercomparedthephylogeneticrelationshipbasedon16SrRNAsequenceand16S-23SrRNAspacerregionofvariousstrainsfromtenhostsusingneighborjoiningmethod.AllstrainsofX.fastidiosafromdifferenthostweredistinguishedtwogroups,peargroupandotherhostgroup.Theotherhostgroupweresubdividedintofoursubgroup:(1)oleander,(2)grapeandmulberry,(3)citrusandcoffee,and(4)pecan,peach,plumandsycamore.Accordingtotheabove16SrRNAsequenceand16S-23SrRNAspacerregiondata,pearleafscorchstrainsweremuchlowhomologyincomparisonwithstrainsofX.fastidiosafromotherhostandinduceddiseasewhichonlyreportedinTaiwan.WepostulatedpearleafscorchstrainscouldbeanewsubspeciesorspecieswithinthegeneraofXylella.ThedevelopedPCRidentifiedtechniquesofX.fastidiosacouldbeausefultoolforrapiddetectionofPLSbacteriumininsectvectorsandalternativehostsinTaiwaninthefuture.Therationalculturalpratices,suchasroguingdiseasedplant,avoidingbudorcuttingfrominfectedtreesforvegetablereproductionandincreasingamendmentsoforganicmatters,couldalleviatediseasesymptoms.InjectionofoxytetracyclinesolutioninMayandOctoberpartiallysuppresseddiseasedevelopment.
URI: https://scholars.tari.gov.tw/handle/123456789/4505
ISBN: 978-986-02-6217-9
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