螢光分析法：利用某些物質被紫外光照射後處於激發態 - 華人百科

利用某些物質被紫外光照射後處於激發態，激發態分子經歷一個碰撞及發射的去激發過程所發生的能反映出該物質特性的螢光，可以進行定性或定量分析的方法。

中文名稱螢光 ... 螢光分析法利用某些物質被紫外光照射後處於激發態，激發態分子經歷一個碰撞及發射的去激發過程所發生的能反映出該物質特性的螢光，可以進行定性或定量分析的方法。

中文名稱螢光分析法特    點靈敏度更高用    途可以進行定性或定量分析說    明反映出該物質特性螢光分析法特點:靈敏度更高10-10-10-12g/ml，套用不如UV廣泛。

套用:①直接螢光光度法②作為HPLC的檢測器(用的多)根據物質分子吸收光譜和螢光光譜能級躍遷機理，具有吸收光子能力的物質在特定波長光(如紫外光)照射下可在瞬間發射出比激發光波長長的光，即螢光。

SO2分子受特定光照射後處於激發態的SO2分子返回基態時發出螢光,其螢光強度與SO2呈線性關係,從而可測出氣體濃度。

當檢測儀器系統確定後，螢光總光強I與SO2濃度的之間的關係可表示為:I=KC在穩定的條件下，這些參數也隨之確定，k可視為常數。

因此，式I=kC表示的紫外螢光光強I與樣氣的濃度C成線性關係。

這是紫外螢光法進行定量檢測的重要依據。

直接測定法利用物質自身發射的螢光進行測定分析。

間接測定法由於有些物質本身不發射螢光(或螢光很弱)，這就需要把不發射螢光的物質轉化成能發射螢光的物質。

例如用某些試劑(如螢光染料)，使其與不發射螢光的物質生成絡合物，各種絡合物能發射螢光，再進行測定。

因此螢光試劑的使用，對一些原來不發螢光的無機物質和有機物質進行螢光分析打開了大門，擴展了分析的範圍。

不管是直接測定，還是間接測定，一般的採用標準工作曲線法，取各種已知量的螢光物質，配成一系列的標準溶液，測定出這些標準溶液的螢光強度，然後給出螢光強度對標準溶液的濃度的工作曲線。

在同樣的儀器條件下，測定未知樣品的螢光強度，然後從標準工作曲線上查出未知樣品的濃度(即含量)。

一般常用的螢光分析儀器有:目測螢光儀(螢光分析燈)，螢光光度計和螢光分光光度計三種。

特點螢光分析是一種先進的分析方法，它比電子探針法、質譜法、光譜法、極譜法等都套用的較廣泛和普及，這同螢光分析具有很多優點分不開的。

螢光分析所用的設備較簡單，如目測螢光儀和螢光光度計構造非常簡單完全可以自己製造。

比起質譜儀、極譜儀和電子探針儀來它在造價上要便宜很多倍，而且螢光分析的最大特點是:分析靈敏度高、選擇性強和使用簡便。

同時具備這三大特點的儀器並不多。

靈敏度高螢光分析法的最大特點是靈敏度高，對某些物質的微量分析可以檢測到10克數量級，如污水中的銀含量用螢光分析法可以檢測到1x10克，汞可以檢測到1x10克。

對一些激素亦可檢測到10克。

螢光分析的靈敏度比分光光度法的靈敏度高2~3個數量級，這是由於螢光分析的螢光和入射光之間成直角，而不在一條直線上，所以是在黑背景下檢測螢光。

而分光光度法的接收器與入射光在一條直線上，所以它是在亮背景下檢測。

因此螢光分析法比分光光譜法靈敏度高。

分光光譜法的靈敏度一般只能檢測到10克，兩者相差三個數量級。

當然螢光分析法比起帶電子顯微鏡的電子探針法靈敏度又低一些(它可達10克數量級)，然而電子探針儀器價格昂貴，使用不方便。

選擇性強螢光分析的第二個特點是選擇性強，特別是對有機化合物而言。

因螢光光譜既包括激發光譜又包括發射光譜，凡是能發射螢光的物質，必須首先吸收一定波長的紫外線，而吸收了紫外線後不一定就發射螢光。

能發射螢光的物質，其螢光波長也不盡相同。

如果即使螢光光譜相同的話，而它的雷射光譜也不一定相同。

反之如果它們的激發光譜相同，則可用發射光譜把它們區分開來，因此供選擇的餘地是比較多的。

所以螢光分析的選擇性很強。

例如有兩種物質，它們的螢光光譜很相似，不易把它們分開。

但它們的雷射光譜不會相同，因此就可用掃描雷射光譜把它們分開。

如果用分光光譜法就難以辦到這一點，因為分光光譜只能得到待測物質的特徵吸收光譜。

所以分光光譜法的選擇性就沒有螢光分析法強。

用例有機物質的螢光分析有機化合物的螢光分析套用很廣泛，能測定的有機物質有數百種之多，如酶和輔酶的螢光分析，農藥和毒藥的螢光分析，胺基酸和蛋白質的螢光分析，核酸的螢光分析。

這些構成了目前螢光分析技術的主要內容。

許多有機化合物在紫外線的照射下，所發螢光並不強或不發螢光，因此必須使用某些有機試劑，以便生成的產物在紫外線照射下能發射強的螢光。

例如脂肪族有機化合物就是用間接方法測定的。

無機元素的螢光分析在紫外線照射下能直接發射螢光的化學元素並不很多，所以對一些元素進行螢光分析時大部分採用間接測定法，這就是用有機試劑與被測定的元素組成絡合物。

這些絡合物在紫外線照射下能發射出不同波長的螢光素，然後由螢光強度測定出該元素的含量。

由於有機螢光試劑的品種繁多，用螢光分析可測定的元素有六十多種。

例如對鉛的螢光分析:鉛離子Pb與Cl離子組成鉛氯絡合物，該絡合物在短波紫外光270毫微米激發下，它會發射出藍色螢光，螢光峰值波長在480毫微米，根據螢光強度在標準工作曲線上測定出Pb的含量。

該法能測定0.1~0.6微克鉛/毫升。

目錄第一部分螢光分析法的基本原理第一章螢光分析導論第二章螢光與分子結構的關係第三章環境因素對螢光光譜和螢光強度的影響第四章溶液螢光的猝滅第五章螢光儀器第二部分螢光分析方法第六章常規的螢光分析法第七章同步螢光分析法第八章三維螢光光譜分析法第九章時間分辨和相分辨螢光分析法第十章螢光偏振測定第十一章低溫螢光分析法第十二章固體表面螢光分析法第十三章動力學螢光分析法第十四章空間分辨螢光分析技術第十五章單分子螢光檢測第十六章螢光免疫分析法第十七章導數螢光分析法第三部分化合物的螢光分析第十八章無機化合物的螢光分析第十九章有機化合物的螢光分析相關搜尋螢光分析法分子螢光分析法時間分辨螢光分析法其它詞條kitkatvisualfoxpro五河士道價值冰冰好料理午夜巴黎華悅台灣電力公司國文天擎妖妖小精尾骨痛故步自封曾文水庫月光疾風機械製圖腳本大師西餐禮儀邵玉銘陰莖折斷螢光分析法@華人百科螢光分析法