常规压片法制作植物染色体玻片标本_实验方法 - 丁香通

常规压片法制作植物染色体玻片标本. 2013-07-24 18:29. 一、实验目的. 1、了解植物细胞周期中染色体的动态变化。

2、学习植物染色体常规压片技术。

二、实验原理. 常规压片法制作植物染色体玻片标本 2013-07-2418:29 一、实验目的 1、了解植物细胞周期中染色体的动态变化。

2、学习植物染色体常规压片技术。

二、实验原理 植物染色体的常规压片技术是观察染色体常用的方法。

该技术以生长、分裂比较旺盛的植物根尖细胞为材料，经预处理、固定、解离、染色、压片等程序，就可以观察到较多的处于有丝分裂中期的细胞和染色体。

三、实验材料 洋葱鳞茎或蚕豆种子。

四、实验器具及药品 恒温培养箱，恒温 水浴 锅，显微镜，解剖器，载玻片及盖玻片，白瓷盘，秋水仙素，甲醇，冰醋酸，盐酸，乙醇，改良石炭酸品红（卡宝品红）。

卡宝品红染色液的配制：先配母液A和B。

母液A：称取3克碱性品红，溶解于100毫升的70％酒精中（此液可长期保存）。

母液B：取母液A10毫升，加入90毫升的5％石碳酸水溶液，充分混匀，置37℃温箱温溶2-4小时（2周内使用）。

母液C：取母液B55毫升，加入6毫升冰醋酸和6毫升37％的甲醛。

充分混匀。

染色液：取母液C10—20毫升，加入80—90毫升45％的醋酸和1.0克山梨醇（sorbitol）。

此染色液初配好时颜色较浅，放置二周后，染色能力显著增强，在室温下不产生沉淀而较稳定。

常温下可保存2年。

五、实验说明 1.根尖由于取材方便，是观察植物染色体最常用的材料，有些植物种子难以发芽，或仅有植株而无种子，也可以用茎尖作为材料。

2.植物细胞分裂周期的长短不尽相同，通常在十到几十小时之间，温度明显地影响分裂周期，对于一个不太熟悉的实验材料，最好在特定温度下长根，掌握有丝分裂高峰期，以便得到更多的有丝分裂的细胞。

3.前处理的目的是降低细胞质的粘度，使染色体缩短分散，防止纺锤体形成，让更多的细胞处于分裂中期，一般在分裂高峰前，把根尖放到药剂中处理3—4小时。

可处理的药剂很多，如秋水仙素、对二氯苯、8-羟基喹啉等。

4.解离的目的是使分生组织细胞间的果胶质分解，细胞壁软化或部分分解，使细胞和染色体容易分散压平，解离方法有酸解法和酶解法。

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