應用聚合酵素連鎖反應偵測梨葉緣焦枯病菌
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Specific Detection of Xylella fastidiosa Strains Causing Pear Leaf Scorch by Polymerase Chain Reaction ... 繁體中文DOI: 10.6649/PPB.200809_17(3).0001 DOI.
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2009年A期刊產出論文15篇,2009年A期刊產出論文在2009年被引用20次
2008年A期刊產出論文16篇,2008年A期刊產出論文在2009年被引用30次
→
2010年的影響係數
=(20+30)÷(15+16)≒1.61
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植物病理學會刊
17卷3期(2008/09/01)
EffectofTemperatureontheSurvivalofMeloidogyneincognita
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P183-194
生物農學
>
植物學
DOI:
10.6649/PPB
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應用聚合酵素連鎖反應偵測梨葉緣焦枯病菌
SpecificDetectionofXylellafastidiosaStrainsCausingPearLeafScorchbyPolymeraseChainReaction
蘇秋竹(C.C.Su)
;
楊文仁(W.J.Yang)
;
徐世典(S.T.Hsu)
;
曾國欽(K.C.Tzeng)
植物病理學會刊
;
17卷3期(2008/09/01)
,
P183-194
繁體中文
DOI:
10.6649/PPB.200809_17(3).0001
梨葉緣焦枯病菌;專一性引子對;聚合酵素連鎖反應;偵測;Xylellafastidiosa;pearleafscorch;specificprimerset;polymerasechainreaction;detection
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摘要
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摘要
〈TOP〉
梨葉緣焦枯病(Pearleafscorch)爲台灣橫山梨(Pyruspyrifolia)栽植區特有之病害,其病原菌爲局限導管細菌(XylellafastidiosaWells),但梨葉緣焦枯病菌與其他寄生植物來源之X.fastidiosa菌株間無血清相關性,且以X.fastidiosa廣效性引子對272-int-1/272-int-2及RST31/RST33對梨葉緣焦枯病菌菌株進行PCR反應時,亦無任何基因産物。
爲研發快速鑑定及偵測梨葉緣焦枯病菌之PCR技術。
本研究利用隨機引子進行RAPD分析,成功獲得對梨葉緣焦枯病菌獨有之約1,400bp大小核酸片段,進一步將此核酸片段轉殖及序列解序,確認此核酸片段大小爲1,412bp(GenBank注冊編碼爲DQ452418),從所得核酸序列中設計得到一組專一性引子PLS-F/PLS-(5'-TGGACGTTGTGGTATCGGTG-3'/5'-TTGAAGTTGACGTGTGGCTG-3'),此一引對測試梨葉緣焦枯病菌30個菌株皆可增幅出416bp大小之專一性基因産物,但測試來自於夾竹桃(oleander)、胡桃樹(pecan)、李樹(plum)、桃樹(peach)、葡萄(grape)、桑椹(mulberry)及無花果(sycamore)等7種寄生植物之X.fastidiosa34個菌株及一般植物病原細菌10個菌株之基因體核皆無法增幅出基因産物。
此一引子對可直接進行梨葉緣焦枯病田間罹病梨樹組織之PCR檢測,具有潛力可應用於田間寄主植物及蟲媒內病原菌偵測。
並列摘要
〈TOP〉
Pearleafscorch(PLS)diseaseisuniqueitsTaiwanandonlyfounditsareaswheretheHengshenvariety(Pyruspyrifolia)isgrown,ItiscausedbyXylellafastidiosa,axylemlimitedbacterium,However,PLSstrainsarenotserologicallyrelatedtostrainsofX.fastidiosafromotherhosts.Likewise,noDNAfragmentwasamplifiedfromPLSstrainswithtwouniversalprimersetsofRST31/R5T33and272int/272-int-2usedtodetectstrainsofX.fastidiosafromotherhosts.inthisstudy,wedevelopedapolymerasechainreaction(PCR)techniquetospecificallyidentifyanddetectPLSbacterium.TherandomamplifiedpolymorphicDNAtechniquewasemployedandafragmentof1,412bpinsitewasspecificallyamplifiedwitharandomprimerOPA11forPLSstrains(GenBankaccessionno.DQ452418).AsetofspecificprimerPLS-F/PLS-R(5'TGGACGTTGTGGTATCGG1G-3'/5'-TTGAAGTTGACGTGTGGCTG-3')designedfromthe1,412-bpDNAamplifieda416bpfragmentfrontall30PLSstrainstestedhutnotfrom34strainsofX.fastidiosaoriginallyisolatedfromotherhosts,includingoleander,pecan,plum,peach,grape.mulberryandsycamore,norfrom10strainsofplantpathogenicbacteriaotherthanXylwella.TheprimersetcanefficientlydetectPLSbacteriuminPLSdiseasedleaftissuescollectedfromfields.WeproposedthePERtechniquedevelopedinthisstudycouldheausefultoolforrapiddetectionofPLSbacteriuminpotentialinsectvectorsandalternativehostsinthefuture.
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